Capacidade de Fertilização in vitro de Espermatozoides de Gatos Domésticos Recuperados de Caudas do Epidídimo Vitrificadas: Um Modelo Experimental para a Conservação de Felinos Selvagens
Criopreservação, Espermatozoides do Epidídimo, Felino, morfometria, seleção espermática
O objetivo deste estudo foi produzir embriões in vitro de gatos domésticos (Felis catus)
utilizando espermatozoides recuperados de caudas epididimárias vitrificadas. A pesquisa
foi dividida em três experimentos e incluiu uma revisão de literatura sobre os
espermatozoides epididimários de gatos domésticos em biotécnicas de reprodução assistida:
perspectivas para aplicação em felídeos selvagens. No Experimento I, avaliou-se a
capacidade fecundante de espermatozoides vitrificados utilizando dois meios de maturação
oocitária in vitro: Albumina Sérica Bovina (BSA) e Soro Fetal Bovino (SFB). As taxas de
maturação foram de 60% (BSA) e 52% (SFB), sem diferenças estatísticas na expansão do
cúmulo ou na maturação nuclear. A fertilização resultou em taxas de clivagem de 26,7%
(BSA) e 20,2% (SFB) e taxas de blastocisto de 28,2% e 18,8%, respectivamente, também
sem diferenças significativas (P>0,05). Este foi o primeiro estudo a utilizar espermatozoides
de caudas do epididimo vitrificados na FIV com diferentes suplementações proteicas,
produzindo embriões de gatos in vitro com sucesso. O Experimento II, O estudo avaliou a
integridade da cromatina, fragmentação de DNA e parâmetros espermáticos de gatos
domésticos após a vitrificação, comparou os métodos de seleção espermática (lavagem
simples e swim-up) e analisou a capacidade de fertilização in vitro dos espermatozoides
selecionados. E foi dividido em três etapas: (1) avaliação de parâmetros espermáticos
(motilidade, fragmentação de DNA, integridade acrossomal e de membrana, e morfologia)
antes e após a vitrificação; (2) comparação de técnicas de seleção espermática (lavagem
simples e swim-up) após a vitrificação; e (3) realização de FIV com espermatozoides
selecionados. A integridade do DNA foi preservada entre amostras frescas (67,2 ± 4,2) e
aquecidas (59,9 ± 4,2; P=0,3). A lavagem simples manteve melhor a integridade do DNA e
do acrossoma (70% vs. 42%) em comparação ao swim-up, enquanto este último selecionou
maior proporção de espermatozoides normais (80% vs. 59,2%). Não houve diferenças
significativas (P>0,05) nas taxas de clivagem, mórula e blastocisto entre os métodos de
seleção. No Experimento III, foi feita a análise morfométrica das cabeças dos
espermatozoides recuperados após a vitrificação revelou alterações significativas (P<0,05)
na forma e no tamanho em comparação às amostras frescas, indicando impacto direto da
vitrificação na morfologia espermática. O estudo demonstra a viabilidade de produzir
embriões de gatos domésticos pela FIV utilizando espermatozoides recuperados de caudas
epididimárias vitrificadas. Contudo, esforços futuros devem focar na otimização das
condições de cultivo in vitro e das técnicas de seleção espermática para melhorar os
resultados na produção embrionária.