Banca de DEFESA: ADRIEL BEHN DE BRITO

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ADRIEL BEHN DE BRITO
DATA: 10/07/2023
HORA: 15:00
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

Vitrificação e cultivo in vitro em fragmento de córtex ovariano de Sapajus apella (Linnaeus, 1758): Efeitos dos dispositivos “ovarian tissue cryosystem (OTC)” e do emprego de antioxidantes e reguladores de estresse osmótico

PALAVRAS-CHAVES:

vitrificação

biópsia ovariana

cultivo in vitro

primatas neo-tropicais

Sapajus apella

PÁGINAS: 88
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Zootecnia
SUBÁREA: Produção Animal
RESUMO:

SourceURL:file:///home/Sheyla/Documentos/ORIENTANDOS/Tese Adriel 20-06-2023.doc

Os objetivos desse trabalho foram (1) comparar a utilização de Ovarian tissue cryopreservation (OTC) e de palhetas como métodos de vitrificação; (2) avaliar o efeito do cultivo in vitro de tecido ovariano vitrificado em um meio adicionado ou não de betaína ou Salubrinal, reguladores de estresse osmótico, e (3) avaliar o efeito do estresse causado pelo cultivo in vitro e pela vitrificação sobre a expressão de fatores angiogênicos VEGF e Cd31 (PECAM1). Logo, foram realizados dois experimentos: Experimento I - de cada ovário de 5 fêmeas, 1 biopsia ovariana foi coletada e dividida em 12 fragmentos de 1,5 mm³ (1 mm de altura x 1 mm de largura x 1,5 mm de comprimento). Três fragmentos foram escolhidos aleatoriamente e destinado para histologia clássica (HC) e IHC. Estes fragmentos constituíram o Grupo Controle a fresco. Os demais fragmentos foram vitrificados de acordo com o protocolo do OTC denominado de Tratamento I (Vitrificação em OTC – MEM + 10 mg/mL BSA + 0,25 M de sacarose + 20% de etilenoglicol  e 20% de dimetilsulfóxido); palheta utilizando o protocolo modificado, vitrificação em palheta no lugar de OTC, denominado de Tratamento II (Vitrificação em Palheta de 0,5 ml – MEM + 10 mg/mL BSA + 0,25 M de sacarose + 20% de etilenoglicol  e 20% de dimetilsulfóxido) e Kawamura et al. (2013), denominado de Tratamento III (Vitrificação em Palheta de 0,5 ml – Meio H199 + 20% de SSS + 5,64 M (31,5%) de etilenoglicol + 5% PVP + 0,5 M de sacarose).  Experimento II - fragmentos do córtex ovariano de fêmea de Sapajus Apella, com tamanho igual ao descrito no tratamento I, foram vitrificados utilizando os dois melhores tratamentos das Fases I ou imediatamente cultivados in vitro com diferentes concentrações de betaína (0 e 0,01%) ou Salubrinal (0 nM e 100 nM). O tecido vitrificado também foi posteriormente cultivado in vitro com betaína e salubrinal, conforme descrito acima: Resultados: na avaliação da distribuição percentual média dos folículos pré-antrais do tecido a fresco, foi observado que os folículos primordiais (48±8%⁾, foram encontrados em maior quantidade, seguido por folículos de transição (23±4%⁾ e primários (21±3%). Como esperado, a população de folículos secundários (8±4%) foi observada em menor quantidade. Na comparação entre os três métodos de vitrificação testados e o controle, em relação ao percentual médio dos folículos normais, foi observado que a porcentagem de folículos normais só foi mantida similar ao controle (85,6 ± 4,4) no Tratamento II (77,9 ± 3,4), mesmo obtendo bons percentuais de folículo normais no Tratamento I (74,5 ± 1,9) e no Tratamento III (70,8 ± 4,5). Desta forma, no presente estudo, foi possível realizar a caracterização da morfologia, morfometria e expressão de fatores angiogênicos em folículos pré-antrais normais e atrésicos de Sapajus apella. Esta descrição pode apoiar a análise da qualidade folicular e sobrevida após procedimentos como transplante e criopreservação.  Também foram obtidos percentuais de folículos normais, no tecido do córtex ovariano após vitrificação, aquecimento e cultivo, em percentuais similares aos encontrados imediatamente após a vitrificação e aquecimento, demostrando as técnicas realizadas foram eficientes e promissoras.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1354467 - SHEYLA FARHAYLDES SOUZA DOMINGUES
Externo ao Programa - 948.066.912-91 - DANUZA LEITE LEÃO - UFPA
Externo à Instituição - CINTHIA TAVORA DE ALBUQUERQUE LOPES
Externo à Instituição - DANIELLE CRISTINA CALADO DE BRITO
Externo à Instituição - DÉBORA DA VERA CRUZ ALMEIDA
Externo à Instituição - WLAISA VASCONCELOS SAMPAIO