Banca de DEFESA: FABÍOLA SILVEIRA GOMES

Título: DESENVOLVIMENTO E AVALIAÇÃO DO TESTE DE AGLUTINAÇÃO COM PARTÍCULAS DE LÁTEX UTILIZANDO ANTICORPOS POLICLONAIS PARA DETECÇÃO DE ANTIGENEMIA NA PARACOCCIDIOIDOMICOSE Palavras chave: Paracoccidioidomicose; Sorodiagnóstico; Aglutinação com partículas de látex; Antigenemia; Páginas: 161 Grande Área: Ciências Biológicas Área: Microbiologia Sub-Área: Microbiologia Aplicada Especialidade: Microbiologia Médica Resumo: A Paracoccidioidomicose (PCM) é uma doença considerada endêmica na América Latina, causada pelos fungos termo-dimórficos Paracoccidioides brasiliensis e P. lutzii. O fungo, inicialmente, infecta os pulmões, mas também pode se disseminar pelo organismo do hospedeiro. Dessa maneira, os indivíduos podem desenvolver infecção subclínica ou as formas aguda ou crônica da doença. O diagnóstico definitivo da PCM pode ser determinado pelo exame direto ou cultura de amostras clínicas, no entanto, os dois são frequentemente negativos. Assim, testes sorológicos são altamente sensíveis e importantes no diagnóstico precoce e seguimento sorológico dos pacientes diagnosticados. A técnica conhecida como "padrão ouro", para o diagnóstico sorológico da PCM, é a Imunodifusão Dupla (ID). Por outro lado, a ID é possível apenas em laboratórios de referência que possuem infraestrutura adequada para o desenvolvimento desta técnica, o que requer o deslocamento dos pacientes às regiões em que o diagnóstico é realizado. O presente estudo objetivou desenvolver e avaliar um teste sorológico baseado na aglutinação passiva reversa de partículas de látex (LAT), revestidas com anticorpos policlonais anti-Paracoccidioides, para a detecção de antigenemia na PCM. Um pool de exoantígenos (P. brasiliensis (339, IOC, 113 e 101) e P. lutzii (01like e IEC-2005)) foi usado como preparação antigênica para a imunização de coelhos, dos quais foram obtidas IgG policlonal. Estas foram acopladas a partículas de látex de poliestireno (0,8 µm), em tampão salina glicina (pH 8,2). Os testes sorológicos foram realizados em amostras de pacientes com PCM (n=45), histoplasmose (n=14), aspergilose (n=4), criptococose (n=6), cromoblastomicose (n=2) e controles sem infecção (n=14). O LAT, para a detecção de antigenemia na PCM, apresentou sensibilidade e especificidade de 42% e 73%, respectivamente. A concordância entre o LAT desenvolvido neste estudo e a ID foi de 53%. Um LAT que detectou anticorpos foi produzido a fim de comparar o desempenho de ambos os LAT. Os valores de sensibilidade (71%), especificidade (75%) e concordância com a ID (77%) sugerem que o LAT para detecção de anticorpos seja melhor como ferramenta sorodiagnóstica na PCM, considerando-se os ensaios baseados em aglutinação. Sugere-se que a sensibilidade (LAT detectando antigenemia) foi limitada, devido ao arranjo policlonal de partículas sensibilizadas, bem como às prováveis concentrações de antígenos circulantes no soro de pacientes abaixo do limite detectável no LAT (12,5 µg/mL). Propõe-se que a avaliação de um LAT, utilizando anticorpos monoclonais, seja necessária para que se possa discutir a aplicabilidade real deste teste. Membros da Banca Presidente 330.495.642-53 - SILVIA HELENA MARQUES DA SILVA - UNIFESP Interno 2206136 - LUIZ FERNANDO ALMEIDA MACHADO Interno 1624683 - ANA CECILIA RIBEIRO CRUZ Externo ao Programa 1682681 - MARTA CHAGAS MONTEIRO Externo ao Programa 1376254 - ANTONIO HERNANDEZ GUTIERREZ Externo à Instituição KARLA VALERIA BATISTA LIMA - IEC