Banca de DEFESA: POLIANA DA SILVA LEMOS

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: POLIANA DA SILVA LEMOS
DATA: 28/02/2019
HORA: 08:30
LOCAL: auditorio IEC- Ananindeua
TÍTULO:

MICROBIOTA INTESTINAL E EXPRESSÃO GÊNICA DIFERENCIAL DE Haemagogus janthinomys DYAR, 1921 (DIPTERA: CULICIDAE) EM RESPOSTA AO VÍRUS DA FEBRE AMARELA

PALAVRAS-CHAVES:

Haemagogus janthinomys; vírus da Febre Amarela; microbiota; transcriptoma; miRNA.

PÁGINAS: 183
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Microbiologia
SUBÁREA: Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
ESPECIALIDADE: Virologia
RESUMO:

Os mosquitos da espécie Haemagogus janthinomys são considerados os principais vetores silvestres do vírus da Febre Amarela (YFV) no Novo Mundo. Eles são extremamente susceptíveis à infecção pelo vírus amarílico. Para conhecer melhor o perfil deste vetor, este  trabalho objetivou descrever a composição da microbiota intestinal de fêmeas adultas coletadas em área de floresta e fêmeas nascidas em laboratório. Além disso, objetivou-se descrever o transcriptoma total e avaliar a resposta do mosquito (em nível de expressão gênica e de microRNAs) após um repasto infectante contendo partículas do YFV. Então, foi feita a extração do DNA metagenômico e sequenciamento pela plataforma GS FLX 454. Depois foram realizadas as análises de diversidade e riqueza da microbiota dos mosquitos silvestres e de laboratório. Para as análises de transcriptoma e expressão diferencial, foram montados grupos de fêmeas, que foram submetidos ao repasto sanguíneo infeccioso e não infeccioso. As fêmeas do grupo controle (Negativo) não foram alimentadas com sangue. Com os grupos montados foi feita a confirmação da infecção por PCR em Tempo Real. Em seguida, os RNAs
foram extraídos, parte do material foi destinado ao RNA-seq e outra parte ao sequenciamento
de miRNAs. Após o RNA-seq, as leituras foram montadas por De novo e foi feita a anotação dos transcritos de acordo com a Ontologia Gênica e as vias KEEG. Os transcritos de cada amostra foram normalizados e calculou-se a expressão diferencial, assumindo como diferencialmente expressos os transcritos que apresentaram AdjPValue <0,05 e logFC ≤-0,58 ou ≥ 0,58. Os miRNAs também foram sequenciados pela plataforma Illumina e analisados contra o banco de miRNAS da plataforma miRBase. Os miRNAs foram anotados e se calculou a expressão diferencial entre os grupos infectados e não infectados, alimentados e não alimentados. Nos resultados, observou-se que a composição da microbiota intestinal de H. janthinomys é constituída predominantemente por proteobactérias. Porém a diversidade de espécies bacterianas difere bastante entre os mosquitos silvestres e os criados em laboratório. O transcriptoma foi montado e a anotação funcional mostrou que a maioria dos transcritos pertencem a categoria ‘processos biológicos’. A análise da expressão diferencial mostrou que os mosquitos aparentemente sofrem uma modulação da resposta imune influenciada pela presença do vírus. Mostrou ainda que o repasto sanguíneo provoca no inseto uma redução significante da atividade redox e que esta atividade é ainda mais atenuada na presença do
YFV. Muitos miRNAs são regulados negativamente durante o repasto infeccioso e alguns deles estão relacionados ao processo de morte celular.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 558.405.232-91 - MARCIO ROBERTO TEIXEIRA NUNES - IEC
Interno - 118.790.092-34 - MARINETE MARINS PÓVOA - IEC
Externo ao Programa - 2414154 - JANAINA MOTA DE VASCONCELOS MASSAFRA
Externo à Instituição - JOÃO LÍDIO DA SILVA GONÇALVES VIANEZ JÚNIOR
Externo à Instituição - VALERIA LIMA CARVALHO