REGISTRO DE PROPRIEDADE INTELECTUAL DO PROTOCOLO DE EXPRESSÃO DO GENE BCR-ABL PARA DIAGNÓSTICO E MANEJO DA LEUCEMIA MIELÓIDE CRÔNICA

A Leucemia Mieloide Crônica (LMC) é uma doença mieloproliferativa que tem origem na célula tronco hematopoiética (stem cell), caracterizada pela translocação cromossômica recíproca t(9;22)(q34;q11), que resulta na junção dos genes BCR e ABL no cromossomo 22q-, o cromossomo Philadelphia (Ph). Esse gene quimérico codifica uma proteína citoplasmática com atividade constitutiva de tirosina cinase, responsável pelos efeitos proliferativos. Diversos exames podem ser executados como auxiliares no diagnóstico da LMC, mas apenas as abordagens citogenéticas, com observação das metáfases e detecção do cromossomo Ph, e por biologia molecular, com a detecção do transcrito específico por RQ-PCR, oferecem a confirmação da LMC, sendo que este último pode ser utilizado como única metodologia para acompanhamento da evolução dos pacientes portadores de LMC pré e pós-terapia com inibidor de tirosina cinase (TKI). Com a introdução dessa nova linha de eficientes fármacos, aumento da sobrevida dos pacientes e consequente aumento da prevalência, a otimização dos ensaios, que historicamente variam de um centro de diagnóstico para outro, e sua padronização são essenciais para obtenção de resultados representativos do real estado da LMC no portador. Dessa forma, objetiva-se neste trabalho estabelecer o protocolo local de diagnóstico e monitoramento da LMC por RQ-PCR, destacando suas diferenças e vantagens em relação aos protocolos disponíveis e sua possível aplicação na rotina de laboratórios de análise clínica, com a entrada de requerimento de patente para proteção da inovação. O protocolo consiste em um conjunto de técnicas e abordagens que o diferenciam dos atualmente estabelecidos, principalmente no que se refere a análise dos dados obtidos, pois aplica um modelo matemático baseado nos princípios de amplificação da própria RQ-PCR, no qual os valores de Ct são comparados para se obter a variação de expressão; outra vantagem é a diferenciação dos dois principais transcritos, graças ao desenho dos primers para regiões conservadas. Com o encaminhamento do registro de patente, espera-se produzir um kit próprio para distribuição comercial.