DETECÇÃO IN SILICO DE MicroRNAS DE PLAQUETAS IDENTIFICADOS COMO BIOMARCADORES DE DANOS CELULARES DURANTE O ARMAZENAMENTO
Concentrado de plaquetas, Dano celular, Perfil diferencial, Biomarcadores.
Os concentrados de plaquetas (CP) contêm uma concentração de microRNAs (miRNAs) que variam ao longo do tempo. Mesmo sob as condições atuais e ideais de armazenamento, modificações e/ou degradação dos componentes em bolsas de sangue podem ocorrer. Essas alterações, conhecidas como lesões de armazenamento, afetam a vida útil e a qualidade do CP. Dessa forma, para investigar o dano do armazenamento em unidades de CP, o perfil diferencial de miRNAs pode ser uma ferramenta útil na identificação de alterações em plaquetas armazenadas em condições ex vivo. Por meio de NGS (Next-Generation Sequencing) foi caracterizada a variação quantitativa da expressão de miRNAs em 16 unidades de CP, influenciada pelo armazenamento de sete dias em banco de sangue. Foram identificamos os 14 miRNAs com a maior variação da expressão diferencial em relação ao primeiro dia de armazenamento. O primeiro dia foi usado como controle das plaquetas de alta qualidade quando comparado com outros seis dias. 9 miRNAs mostraram perfil downregulated (hipo-expressos) e outros 5 miRNAs com perfil upregulated (hiper-expressos). A expressão desses miRNAs foram validadas em RQ-PCR para 100 unidades de CP. Essas variações quantitativas na expressão dos miRNAs mostra que, de alguma forma, estão envolvidos na fisiologia das plaquetas, principalmente, após a ativação plaquetária, ocasionando o dano celular. Análises de Agrupamento Hierárquico e a Análise de Componentes Principais (PCA) serão usados para agregar maior eficiência aos resultados, mostrando como o dano celular pode influenciar as mudanças nos perfis de grupos de miRNAs, que serão apontados como potenciais biomarcadores para avaliar a qualidade do CP em banco de sangue.