IDENTIFICAÇÃO DE NOVOS COMPOSTOS BIOATIVOS DE CIANOBACTÉRIAS
Cianobactéria; Metabólitos secundários; Biologia Sintética; Expressão heteróloga
Os produtos naturais são uma fonte de inspiração para o desenvolvimento de novas drogas. Com o advento do sequenciamento genômico e a evolução de tecnologias de bioinformática, ficou claro que os microrganismos apresentam uma grande capacidade em sintetizar produtos naturais com amplo espectro de atividade. As cianobactérias são consideradas um importante grupo de procariontes fotossintetizantes na geração de uma variedade de compostos com estruturas únicas e propriedades biológicas do tipo antitumorais, antivirais, antibacterianos, anticancerígenos, etc. Dentre as metodologias utilizadas para a identificação de novos compostos microbianos, encontra-se aquela que parte de análises genômicas. Geralmente, os genes biossintéticos envolvidos na síntese de um produto, encontram-se agrupados no genoma, em configuração de “linha de montagem”. Um recurso para se estudar o composto produzido a partir desses agrupamentos gênicos consiste em induzir sua expressão, principalmente por expressão heteróloga. Assim, a biologia sintética representa uma das estratégias mais eficazes para a descoberta de novos produtos naturais. Contudo, muitas dessas técnicas foram em sua maioria padronizadas para microrganismos não cianobacterianos, e geralmente não apresentam o mesmo êxito para as cianobactérias. Estratégias testadas para estes organismos fotossintetizantes apresentaram resultados variados. Recentemente, uma nova estratégia DiPaC (Direct Pathway Cloning) permitiu a captura e expressão de agrupamentos gênicos biossintéticos cianobacterianos com sucesso. Desse modo, no intuito de identificar e caracterizar novos produtos naturais de cianobactérias, este trabalho tem por objetivo expressar agrupamentos gênicos biossintéticos desses microrganismos, provenientes da região amazônica. Para esse fim, foram realizadas a mineração genômica de alguns isolados disponíveis no laboratório do Centro de Genômica e Biologia de Sistemas da UFPA. Dos diversos agrupamentos gênicos evidenciados, quatro foram selecionados e estão presentes no genoma de dois isolados de Nostoc sp. A estratégia de clonagem consistirá na utilização da estratégia de DiPaC e expressão em E. coli BAP1. Finalmente, análises químicas serão realizadas para caracterizar cada um dos compostos recém-sintetizados. Estas análises serão realizadas durante estágio sanduíche na Technische Universität Dresden, em parceria com o Prof. Tobias Gulder.