CARACTERIZAÇÃO CITOGENÔMICA DE LINHAGENS CELULARES ONCOHEMATOLÓGICAS PARA APLICAÇÃO EM MEDICINA TRANSLACIONAL
LLA, oncohematologia, linhagens celulares, aCGH, medicina translacional.
A leucemia consiste em um grupo heterogêneo de neoplasias hematológicas que afetam as células de todas as linhagens hematopoiéticas e, de acordo com o tecido em que se origina o clone leucêmico e com a evolução da doença, pode ser categorizada em quatro subtipos: leucemias linfoides crônicas, leucemias linfoides agudas, leucemias mieloides crônicas e leucemias mieloides agudas. Seu desenvolvimento pode estar associado a fatores ambientais, idade e predisposição genética. Este último fator tem sido bastante estudado, sendo identificadas inúmeras alterações genômicas associadas ao surgimento e progressão deste tipo de câncer. As linhagens celulares de câncer são excelentes modelos para estudos in vitro que buscam identificar vias celulares alteradas, mutações em genes críticos associados a carcinogênese, testes de drogas anticâncer, entre outros. Nesse sentido, a caracterização genômica de linhagens celulares tem sido utilizada como recurso para avalição de alterações associados a diferentes tipos de cânceres. Linhagens utilizadas em estudos de leucemia foram estabelecidas para o presente estudo: linhagem SUP-B15, Jurkat, Namalwa e Raji. Até o momento, nenhuma caracterização citogenômica foi realizada nas linhagens citadas. Dessa forma, visando confirmar a ocorrência de alterações genômicas que as validem como modelo para estudos referentes a leucemias, será realizada uma caracterização detalhada dessas linhagens com base em seus cariótipos, alterações no número de copias (CNA) e perfil genômico. Para isso, após as células das culturas atingirem confluência total, será realizada a extração dos ácidos nucleicos e posterior caracterização do cariótipo para então prosseguir com análise das alterações cromossômicas somáticas utilizando a técnica de aCGH. Posteriormente será feita análise do perfil de expressão gênica e avaliação molecular e, por último, para confirmação das alterações de expressão, será realizada a técnica de PCR em tempo Real (qPCR).