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Banca de DEFESA: CARLOS EMILIO MOLANO PATERNINA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: CARLOS EMILIO MOLANO PATERNINA
DATA: 15/07/2020
HORA: 15:00
LOCAL: Por meio de vídeo conferência disponível no link meet.google.com/avn-jvbp-kpz.
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DO POTENCIAL CITOTÓXICO E GENOTÓXICO DO CHUMBO E DO MERCÚRIO EM FIBROBLASTOS HUMANOS


PALAVRAS-CHAVES:

Citotoxicidade; genotoxicidade; metais pesados; carcinogênese ambiental; toxicologia in vitro.


PÁGINAS: 75
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Biologia Geral
RESUMO:

A poluição ambiental é uma das conseqüências da industrialização em larga escala, devido ao despejo de produtos químicos e outros resíduos, principalmente em corpos d'água. Um lugar de destaque é ocupado por metais pesados, devido à sua grande quantidade em resíduos industriais e efeitos nocivos à saúde. Entre eles, destacamos o mercúrio (Hg), usado na extração de ouro na mineração clandestina e descartado nos rios, e o chumbo (Pb), usado como contêiner para agentes radioativos, em tubulações de água, em revestimentos de cabos. Muitas populações humanas estão expostas a doses subletais desses poluentes, sem efeitos agudos. No entanto, nos organismos, os metais pesados podem se acumular e afetar sistemas, órgãos e componentes celulares, incluindo interações com o DNA e certas proteínas nucleares, causando danos e alterações conformacionais no material genético, que podem levar à apoptose, alterações no ciclo celular e aos processos de carcinogênese. Considerando que estudos in vitro fornecem informações importantes sobre as interações de substâncias e componentes celulares, nosso estudo analisou os efeitos citotóxicos e genotóxicos de concentrações subletais de mercúrio e chumbo em fibroblastos humanos. Além disso, os resultados foram analisados por diferentes metodologias, a fim de analisar sua eficiência e complementaridade. Para isso, uma linhagem celular secundária de fibroblastos, não transformada, foi exposta a três concentrações subletais diferentes (5, 10, 15 µM) de MeHg e Pb (NO3)2 por 30 minutos. A citotoxicidade e viabilidade foram analisadas utilizando protocolos baseados no teste de danos à membrana (Azul de Trypan), transformação da resazurina em resorufina e atividades de protease. Além disso, realizamos o teste do MTT. A genotoxicidade foi analisada usando o teste de micronúcleo e o ensaio cometa. Os resultados do azul de Trypan e testes baseados em atividades de protease mostraram que todas as concentrações apresentaram efeitos citotóxicos, com valor p significativo, enquanto o teste com resazurina demonstrou atividade citotóxica apenas nas duas concentrações mais altas. Essa diferença pode ser devido à influência do número de células nos resultados desta técnica. Os resultados obtidos com o teste MTT não concordaram com os demais testes de viabilidade, mas podem ser interpretados como alterações no metabolismo celular, confirmando publicações recentes. O teste de micronúcleo e o ensaio cometa indicaram que ambos os metais são genotóxicos. O MeHg apresentou maior frequência de micronúcleos em relação ao Pb (p <0,001), mas houve maior número de núcleos apoptóticos nas células tratadas com Pb, o que pode indicar que a concentração utilizada foi mais citotóxica que o MeHg e um menor número de células completou o ciclo, para produzir micronúcleos. No ensaio do cometa, que é feito logo após o período de exposição, ambos os metais produziram fragmentação do DNA, com um valor ligeiramente maior de quebras por Pb. Concluímos, portanto, que o mercúrio e o chumbo são citotóxicos e genotóxicos, mesmo em doses subletais. No que diz respeito aos diferentes protocolos, o azul de Trypan, embora simples, é um bom indicador de viabilidade celular, enquanto o MTT se comportou claramente como um indicador do metabolismo celular geral e não deve ser usado como teste de viabilidade. O uso de diferentes testes foi relevante para uma melhor compreensão dos mecanismos de agressão de metais pesados às células, trazendo evidências preliminares sobre os efeitos na saúde humana, além de danos ecológicos.


MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - CIANE MARTINS DE OLIVEIRA
Presidente - 1220143 - EDIVALDO HERCULANO CORREA DE OLIVEIRA
Externo ao Programa - 2358078 - FERNANDA ANDREZA DE PINHO LOTT FIGUEIREDO
Externo ao Programa - 1263503 - MARCELO DE OLIVEIRA BAHIA
Notícia cadastrada em: 01/07/2020 10:53
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