Banca de DEFESA: RODRIGO RODRIGUES VIRGOLINO

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: RODRIGO RODRIGUES VIRGOLINO
DATA: 13/03/2024
HORA: 09:00
LOCAL: Sala SAT-10 - ICB - UFPA
TÍTULO:

PROSPECÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR IN SÍLICO DE MONO-OXIGENASES DE CIANOBACTÉRIAS

PALAVRAS-CHAVES:

Em construção

PÁGINAS: 83
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Biologia Geral
RESUMO:

As monooxigenases líticas de polissacarídeos (LPMOs, do inglês Lytic polysccharide monooxygenases) são enzimas dependentes de cobre que catalisam a clivagem oxidativa de ligações glicosídicas β(1-4) e têm despertado grande atenção por se mostrarem importantes em aumentar a eficiência da degradação de substratos poliméricos recalcitrantes, em sinergismo com a ação de enzimas hidrolíticas, como uma função acessória. No entanto, as LPMOs atuam via clivagem oxidativa ao invés de hidrólise. Em aplicações industriais, LPMOs de origem fúngica são as mais frequentes, enquanto outros grupos taxonômicos têm sido descritos como possíveis fontes alternativas destas enzimas. No presente estudo, objetivou-se identificar e caracterizar in silico uma LPMO de origem cianobacteriana com funções putativas na despolimerização de quitina. A busca por similaridade de sequências e conservação de domínios com outras LPMOs já caracterizadas identificou uma proteína de 289 AAs da cianobactéria Mastigocoleus testarum da Ordem Nostocales, sendo uma provável LPMO da classe CAZy-AA10. Esta proteína é referida como MtLPMO10. A análise filogenética relevou que a MtLPMO10 é homóloga à proteína Tma12 da samambaia Tectaria macrodonta, com 52,11% de identidade, a qual foi a primeira LPMO caracterizada como proveniente do reino vegetal. A ocorrência de padrões estruturais e funcionais compartilhados com outras LPMOs da classe AA10, bem como a existência de variações nesses padrões estabelecidos, contribui para o entendimento das funções biológicas dessa classe de enzimas. A disposição terciária proteica predita pelo servidor AlphaFold apontou características estruturais comuns às LPMOs, em especial uma braçadeira de histidinas compostas pela His31 e His132 e um domínio similar à imunoglobulina composto de fitas beta antiparalelas. A simulação de dinâmica molecular (DM) permitiu avaliar a afinidade entre enzima e prováveis substratos, utilizando uma pose inicial baseada em dados obtidos da literatura. Houve estabilidade do complexo MtLPMO10-chitoheptaose durante 100ns de DM, enquanto o complexo MtLPMO10-celoheptaose desfez-se em 30ns de DM. Também, houve uma menor distância Cu(I)-H4 no primeiro complexo, comparada à distância Cu(I)-H1 (médias 6,0 ± 0,3 Å e 8,1 ± 0,5 Å, respectivamente), sugerindo uma regioseletividade do tipo C4, como definido para a Tma12. Este estudo destaca a existência de monooxigenases líticas de polissacarídeos em cianobactérias, e abre caminho para novas investigações relacionadas a esta classe enigmática de enzimas e seu potencial uso em aplicações biotecnológicas.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1372427 - EVONNILDO COSTA GONCALVES
Interno - 1659023 - JULIANA SILVA CASSOLI
Interno - 1810764 - LUCIANA PEREIRA XAVIER
Interno - 1813553 - LUIS ADRIANO SANTOS DO NASCIMENTO
Externo ao Programa - 3144232 - RONALDO CORREIA DA SILVA