Banca de QUALIFICAÇÃO: FRANCISCO ALEX LIMA BARROS

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: FRANCISCO ALEX LIMA BARROS
DATA: 10/03/2023
HORA: 08:30
LOCAL: Online
TÍTULO:

ESTRATÉGIA DE ALIMENTAÇÃO COM DIETA VIVA ENRIQUECIDA COM PROBIÓTICO ESPÉCIE-ESPECÍFCO Enterococcus faecium NA LARVICULTURA DO PIAUÇU Megaleporinus macrocephalus

PALAVRAS-CHAVES:

Seleção de bactérias, microrganismos autóctones, inibição de patógenos, desempenho produtivo, sanidade.

PÁGINAS: 30
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Recursos Pesqueiros e Engenharia de Pesca
SUBÁREA: Aqüicultura
ESPECIALIDADE: Piscicultura
RESUMO:

A atividade aquícola tem se intensificado cada vez mais. Em contrapartida, uma série de problemáticas como os surtos de bacterioses, são cada vez mais imprevisíveis que surgem nos sistemas de criação. Como remediação, o uso negligente de antibióticos aumenta a pressão de seleção sobre os microrganismos, capaz de estimular a seleção de genes de resistência a estes fármacos. Assim, surge a necessidade do desenvolvimento de técnicas produtivas mais sustentáveis na aquicultura, afim de dispor de opções terapêuticas eficazes para reduzir as perdas em massa na criação de diversas espécies. Entre elas, o piauçu Megaleporinus macrcephalus, se destaca entre as espécies nativas, que é muito apreciada com grandes perspectivas produtivas. Como alternativa, os probióticos são usados para incrementar o desempenho produtivo, melhorar a qualidade sanitária e imunológica dos animais. São microrganismos vivos capazes melhorar a conversão de nutrientes da dieta, melhoram o equilíbrio da microbiota intestinal e ajudam na prevenção de doenças através da modulação do sistema imune do hospedeiro. Assim, a pesquisa objetivou isolar, selecionar in vitro bactérias autóctones do intestino de M. macrcephalus e avaliar o seu efeito, nas fases iniciais de desenvolvimento da espécie, sobre o desempenho do crescimento, modulação da microbiota e morfologia intestinal, além da resistência contra bactérias patogênicas. O estudo foi conduzido em duas etapas: a primeira em isolar e selecionar a cepa com potencial probiótico por testes in vitro. Para tanto, as cepas foram selecionadas do trato intestinal de 15 espécimes saudáveis e inoculadas em placas de Petri contendo Man Rogosa Sharped Agar (MRS), por 48 horas, a 35 ºC. Para o isolamento foram utilizados testes de catalase, coloração de Gram, tolerância a diferentes gradientes de NaCl (1, 2 e 3%), diferentes valores de pH (4, 5, 6, 8 e 9) e sais biliares (2,5 e 5%), além do halo de inibição contra bactérias patogênicas Aeromonas hidrophila, Aeromonas caviae, Aeromonas jandaei, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae. Todos os testes foram realizados em delineamento inteiramente casualizado, com 4 repetições. Para os testes in vivo, náplios de Artêmia sp. enriquecidas com probiótico foram ministradas em quatro tratamentos (C: sem probióticos; T1: 1,0 x 10⁴; T2: 1,0 x 10⁶ e T3: 1,0 x 10⁸ UFC.g^-1) foram utilizados, em quadruplicata. As larvas (n=160; peso = 5,3 ± 2,3 mg e comprimento = 3,73 ± 0,4 mm) foram distribuídas em recipientes de 16 L na densidade de 10 larvas.L^-1 durante 20 dias. Além disso, simultaneamente, outro experimento foi constituído de seis tratamentos, conduzido em delineamento inteiramente ao acaso, em esquema fatorial 3 x 2, composto por três frequências de alimentação (2x, 3x e 4x ao dia) e duas dietas (I sem probiótico) e (II com probiótico), em cinco repetições, fornecidos via alimento vivo enriquecidas com probióticos.  As larvas (n= 300; peso = 5,2 ± 2,6 mg e comprimento = 3,69 ± 0,4 mm) foram distribuídas em 30 recipientes de 1 L na densidade de 10 larvas.L^-1. Após o período de experimentação, o desempenho produtivo, a sobrevivência, a microbiologia e histologia intestinal foram medidos, além do desafio agudo contra a bactéria patogênica Aeromonas hydrophila. Os resultados apresentaram 42 cepas isoladas no experimento in vitro, com destaque para as cepas ST1 e ST9 que apresentaram maiores valores (P < 0,05) para células viáveis totais (31,80 ± 0,07 e 32,51 ± 0,05 UFC/mL × 10⁸), respectivamente. Nos testes de resistência, as cepas ST1 e ST9 apresentaram os melhores resultados, com destaque para ST9 em altos gradientes de pH, altos valores de sais biliares, além dos maiores halos de inibição (19,40 ± 0,99 e 19,08 ± 0,79), contra Aeromonas hydrophila e Aeromonas jandaei, respectivamente. As cepas com melhores resultados nos testes, ST1 e ST9, foram identificadas pelo método de MALDI-TOF-MS como Enterococcus faecium (20218_1 CHB). Para os testes in vivo, a suplementação com 1,0 x 10⁸ UFC.g^-1 promoveu maior ganho de comprimento (13,78 ± 0,40 cm) e peso total (0,08 ± 0,002 g), maior contagem de bactérias lácticas, menor de heterotróficos totais nos intestinos e maiores vilosidades intestinais. As dietas contendo probióticos influenciaram na resistência dos animais à infecção aguda, com menor mortalidade acumulada em T3 e maior em C+. Os resultados das frequências de alimentação mostraram interação significativa (p<0,05), com as maiores médias de ganho de comprimento (14,42 ± 0,45 cm) e peso total (0,06 ± 0,02 g) para a frequência de 4x.dia (dieta II) suplementadas com probiótico, maiores contagem de bactérias ácido láticas na dieta II e maior contagem de bactérias heterotróficas totais na dieta I, nos intestinos. As dietas contendo probióticos influenciaram a resistência dos animais na infecção aguda, com menor mortalidade acumulada no grupo 4x.dia – dieta II, ao contrário do C+. Assim, a bactéria isolada E. faecium, isolada do trato intestinal do piauçu pode ser recomendada para uso probiótico na criação do M. macrocephalus na concentração (1,0 x 10⁸ UFC.g^-1). A suplementação via alimento vivo é uma alterativa de inclusão de vários produtos e substancia na larvicultura, em especial, o probiótico promoveu melhoria no desempenho de crescimento, na modulação da microbiota intestinal e nas vilosidades do intestino e, maior resistência frente a bactéria patogênica. Além disso, a suplementação probiótica com a bactéria autóctone, na frequência de 4x.dia também proporciona melhora zootécnica e modulação da microbiota dos peixes.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1488306 - CARLOS ALBERTO MARTINS CORDEIRO
Interno - 2244947 - DANIEL ABREU VASCONCELOS CAMPELO
Externo ao Programa - 1417425 - LORENA BATISTA DE MOURA
Externo à Instituição - JOEL ARTUR RODRIGUES DIAS
Externo à Instituição - MÁRCIA VALÉRIA SILVA DO COUTO
Externo à Instituição - NATALINO DA COSTA SOUSA
Externo à Instituição - RODRIGO YUDI FUJIMOTO