OTIMIZAÇÃO E VALIDAÇÃO DE UM MÉTODO DE QUANTIFICAÇÃO, VIA CLAE, DO DÍMERO ARC2 (PELLUCIDINA A) PRESENTE NAS PARTES AÉREAS DE Peperomia pellucida E INVESTIGAÇÃO DA ATIVIDADE ANALGÉSICA DA SUBSTÂNCIA.
Pellucidina A, CLAE-DAD, quantificação, atividade analgésica
Peperomia pellucida é uma planta da família Piperaceae que ocorre na Amazônia, onde é conhecida pelo nome popular de erva-de-jaboti. Relatos na literatura indicam que esta planta tem potencial como analgésica, anti-inflamatória, antibacteriana e antifúngica. Estudos fitoquímicos realizados por pesquisadores da Universidade Federal do Pará, levaram, entre outros resultados, ao isolamento e identificação estrutural de uma substância derivada do 2,4,5-trimetoxiestireno, um dímero ArC2 denominado de pellucidina A, obtido das partes aéreas dessa espécie. Assim, o presente trabalho teve como objetivo otimizar e validar um método, via CLAE-DAD, para a quantificação de pellucidina A, presente no extrato acetônico das partes aéreas de P. pellucida, bem como a investigação da atividade analgésica da pellucidina A. O método otimizado e validado, por CLAE, tornou possível quantificar a pellucidina A na matriz de interesse. Os parâmetros instrumentais foram os seguintes: coluna coluna Gemini C18, 3 µm (150 x 4,6 mm), fluxo constante de 1 mL/min.; comprimento de onda 292 nm; lâmpada de deutério; volume da injeção de 20 µL; a composição da fase móvel foi constituída de ACN/H2O (56:44% v/v) no tempo de 0,01 a 10,00 min., em seguida, no tempo de 10,01 a 12,00 min. a composição da fase móvel variou de ACN/H2O (56:44% v/v) a ACN (100%), e a partir de 12,01 até 22,00 min. a concentração voltou a ser constante em ACN/H2O (56:44% v/v). Os parâmetros de validação foram todos aceitáveis como base na ANVISA (2003). O método validado forneceu recuperação de 91,5 a 110,78%. O limite de detecção foi de 0,078 μg.mL-1 e o limite de quantificação de 0,156 μg.mL-1. E o método demonstrou-se robusto frente a pequenas modificações. No teste de contorção, a pellucidina A, nas doses de 1,0 e 5,0 mg/Kg reduziu as contorções abdominais de maneira significativa se comparadas com o controle. Os seguintes resultados sugerem que a pellucidina A possui atividade analgésica de acordo com os testes usados, demonstrando atividade periférica. No teste da placa-quente (55 ± 0,5° C), nas concentrações de 0,5; 1,0 e 5,0 mg/Kg, a pellucidina A não demonstrou induzir alterações no tempo de latência quando comparado com o controle. No ensaio da formalina, a pellucidina A demonstrou induzir alterações na segunda fase do teste na dose de 5,0 mg/Kg.