Banca de DEFESA: SEBASTIÃO GOMES SILVA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: SEBASTIÃO GOMES SILVA
DATA: 23/05/2019
HORA: 09:00
LOCAL: Pós Graduação em Química
TÍTULO:

COMPOSIÇÃO QUÍMICA, ATIVIDADES BIOLÓGICAS, DOCAGEM E DINÂMICA MOLECULAR DO ÓLEO ESSENCIAL DE Lippia thymoides Mart. & Schauer (VERBENACEAE

PALAVRAS-CHAVES:

Lippia thymoides, óleos essenciais, estudo sazonal, ritmo circadiano, timol, acetilcolinesterase, docagem molecular, dinâmica molecular, doença de Alzheimer, atividade antimicrobiana

PÁGINAS: 181
GRANDE ÁREA: Ciências Exatas e da Terra
ÁREA: Química
SUBÁREA: Química Orgânica
ESPECIALIDADE: Química dos Produtos Naturais
RESUMO:

O objetivo principal desta tese foi avaliar a composição química, atividades biológicas, docagem e dinâmica molecular do óleo essencial de Lippia thymoides Mart. & Schauer (Verbenaceae) obtido por hidrosdestilação (HD) e CO₂ supercrítico. Inicialmente foi realizada uma revisão bibliográfica dos óleos essenciais (OE´s) com relação ao aspecto botânico, principais métodos de extração, fatores que influenciam na composição química, potencial bioativo e técnicas de liberação programada. Em seguida foi avaliado a influência da sazonalidade e ritmo circadiano na produção e composição dos OE´s, obtido por HD, das folhas e ramos finos do espécime em questão, onde os constituintes dos óleos foram caracterizados por CG e CG-EM e com a aplicação de análise multivariada: Análise de Componentes Principais (PCA) e Análise de Agrupamentos Hierárquicos (HCA). Também os OE`s dos diversos órgãos de L. thymoides foram extraídos por HD e analisado por CG e CGEM  , além da atividade inibitória da acetilcolinesterase do óleo essencial das folhas frescas em placa de TLC e as interações dos principais compostos com a acetilcolinesterase foram simuladas por estudos de docking e dinâmica molecular. Por fim, foi obtido OE das folhas secas de L. thymoides por CO₂ supercrítico em diferentes temperaturas (40 e 50 °C) e pressões (100, 200 e 300 bar) e analisados por CG e CGEM, rendimentos mássicos, atividade antimicrobiana pelo método de disco-difusão em meio sólido contra Candida albicans (INCQS 40.176), Candida tropicalis (INCQS 40.042), Escherichia coli (ATCC 25911) e Staphylococcus aureus (INCQS - 00015), estudo de docagem e dinâmica molecular com constituinte majoritário do óleo essencial em proteínas alvos, 5V5Z (C. albicans e C. tropicalis), 2W9H (S. aureus) e 1AJ2 (E. coli), para ação de drogas. Os resultados mostraram que nas folhas e ramos finos frescos houve a predominância de monoterpenos oxigenados (70,6-91,8%), seguida de hidrocarbonetos monoterpênicos (1,2 a 21,6%) e sesquiterpênicos (3,9 a 9,1%). Timol, acetato de timol, γ-terpineno, p-cimeno e (E)-cariofileno foram os constituintes principais. O teor médio de timol foi superior no período chuvoso (sazonal: 77,0%; circadiano: 74,25%) com relação ao seco (sazonal: 69,9%; circadiano: 64,5%) e influenciado pelas variáveis climáticas: precipitação pluviométrica, solar radiação, temperatura e umidade relativa. No estudo circadiano, as análises de PCA e HCA foram aplicadas aos constituintes dos óleos nos períodos chuvoso e seco, dois grupos foram formados, a maior concentração de timol caracterizou o grupo 1, seguido por (3Z)-hexen-3-ol, α-tujeno, α-pineno, α-felandreno e epóxido de humuleno II. A maior produção de p-cimeno,  γ-terpineno, acetato de timol e (E)-cariofileno caracterizou o grupo 2, seguido por mirceno, α-terpineno, 1,8-cineol, terpinen-4-ol, metiltimol e germacreno D, em menores concentrações. No estudo dos órgãos foram identificados 75 constituintes, sendo os monoterpenos oxigenados a classe presente em  todas as partes da planta, variando de 19,48 – 84,99%. Nas raízes predominaram os ácidos graxos saturados e insaturados, com teores variando de 39,5% a 32,17%, respectivamente. Na avaliação da atividade anticolinesterásica, os óleos essenciais (limite de detecção (DL) = 0,1 ng / spot) foram cerca de dez vezes menos ativos do que os da fisostigmina (DL = 0,01ng / spot), enquanto timol e acetato de timol apresentaram valores de DL de 0,01 cada ng /spot, equivalente ao do controle positivo. Nos estudos de acoplamento e dinâmica molecular, o timol e  acetato de timol interagem com os resíduos catalíticos Ser203 e His447 do sítio ativo da acetilcolinesterase. As energias livres de ligação (ΔGbind), para estes ligantes, foram de -18,49 e -26,88 kcal/mol, demonstrando que os ligantes são capazes de interagir com a proteína e inibir sua atividade catalítica. Para os óleos obtidos com CO₂ supercrítico o maior rendimento mássico foi na isoterma de 50 °C/300 bar, com valor de 1,63 ± 0.01 %. Foram identificados 49 constituintes químicos, em média de 95,01 ± 0,38 a 98,80 ± 0,43% do conteúdo total das amostras. A classe dos monoterpenos oxigenados foram a predominantes (77,79 ± 2,07 – 91,89 ± 0,87 %). Os principais constituintes nas amostras foram timol com valores médios 74,52 ± 11,24 (40 °C/100 bar) – 88,56 ± 0,65 (50 °C /200 bar), E-cariofileno 3,53 ± 0,60 (50 °C/200bar) a  7,29  ± 0,48 (40 °C/100bar), acetato de timol 1,67 ± 0,26 (50 °C/300bar) – 3,20 ± 1,22 (40 °C/300bar), hidroxianisol butilado 0,32 ± 0,45 (50 °C/300bar) – 3,11  ±  0,93 (40 °C/100bar) e óxido de cariofileno 0,12 ± 0,06 (50 °C/200bar) – 2,47 ± 0,51 ( 40 °C/100bar). Os fungos e bactérias gram positivas foram  susceptíveis aos efeitos do óleo essencial. O timol foi capaz de interagir de maneira favorável com o sitio ativo das proteínas alvo dos micro-organismos. As interações de van der Waals, eletrostáticas e energia de solvatação apolar foram as principais responsáveis pela formação dos complexos droga-receptor. Os resultados obtidos do OE do tipo químico de L. thymoides neste estudo indicam uma possível fonte natural com potencial para o desenvolvimento de fitoterápicos para o tratamento da doença de Alzheimer, assim como agente antimicrobiano, além do conhecimento da influencia sazonal  na composição química do óleo essencial do ponto de vista ecológico e taxonômico, quanto ao manejo e uso econômico das espécies.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1682360 - ELOISA HELENA DE AGUIAR ANDRADE
Interno - 2278490 - DAVI DO SOCORRO BARROS BRASIL
Interno - 327195 - GISELLE MARIA SKELDING PINHEIRO GUILHON
Externo ao Programa - 2205850 - ALCY FAVACHO RIBEIRO
Externo à Instituição - MOZANIEL SANTANA DE OLIVEIRA