Os efeitos da hidroxicloroquina na maturação in vitro de oócitos bovinos.
Maturação oocitária, Bovinos, Hidroxicloroquina, Autofagia
A produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos é uma biotécnica mundialmente difundida para o aumento do ganho genético da espécie, mas também pode ser usada como modelo para pesquisas de toxicologia na reprodução. Em 2019, com o aparecimento do SARS-CoV-2, a hidroxicloroquina (HCQ) foi amplamente utilizada como tratamento off label para a COVID-19 mesmo sob grande controvérsia em relação à sua eficácia e feitos colaterais. Diante disso, este trabalho teve como objetivo utilizar a técnica de PIVE para avaliar a citotoxicidade da HCQ em oócitos bovinos. Deste modo, óocitos bovinos foram maturados in vitro com HCQ (6, 12. 24 µM) e sem HCQ (Controle) por 24h. Após a maturação os oócitos foram ativados partenogeneticamente e os embriões cultivados in vitro por 7 dias. Os resultados indicaram que o tratamento com a HCQ não afetou a taxa de extrusão do primeiro corpúsculo polar e nem taxa de metáfase II (p>0,05). Quanto ao desenvolvimento, não foi observado efeito do tratamento sobre a clivagem (p>0,05), porém ocorreu uma redução significativa (p<0,05) na taxa (%) de blastocistos proporcionalmente ao aumento das concentrações de HQC utilizadas na maturação (Crtl=48,8; 6µM=43,0; 12µM=37,7 e 24µM=30,0). Finalmente, analisamos o processo de autofagia em oócitos e suas respectivas células do cumulus oophorus após a maturação, mediante a coloração com o corante Laranja de Acridina. O tratamento com 24 µM de HCQ promoveu aumento significativo (p<0,05) do bloqueio da autofagia (aumento da fluorescência em relação ao Ctrl) tanto nos oócitos (1,7X maior) quanto nas células do cumulus (2,8X maior). Concluímos que o tratamento com HCQ apesar de não ter afetado a maturação nuclear dos oócitos, afetou a posterior capacidade de desenvolvimento embrionário dos mesmos sendo que este efeito negativo pode estar relacionado ao distúrbio do mecanismo de autofagia na maturação causado pelo tratamento com a droga.