Banca de DEFESA: RAQUEL CARVALHO BOUTH

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: RAQUEL CARVALHO BOUTH
DATA: 09/10/2023
HORA: 14:30
LOCAL: Auditorio do Laboratorio de Genetica Humana e Medica, Campus Belem - UFPA.
TÍTULO:

O papel da biologia molecular no diagnóstico, epidemiologia molecular, e perfil de sensibilidade de cepas de M. leprae em região endêmica da Amazônia Brasileira

PALAVRAS-CHAVES:

Hanseníase, Mycobacterium leprae, qPCR RLEP, genotipagem, droga resistência.

PÁGINAS: 71
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Biologia Geral
RESUMO:

A hanseníase é uma doença crônica, incapacitante e de difícil diagnóstico em todas as suas manifestações clínicas. O objetivo deste estudo foi identificar o melhor marcador laboratorial para o seu diagnóstico, conhecer geneticamente as cepas de M. leprae circulantes no Estado do Pará e avaliar a realidade da droga-resistência na região. Para isso, a equipe multiprofissional avaliou 833 indivíduos em diferentes estratégias na URE Dr. Marcello Candia, e em 14 municípios do Pará. Todos os indivíduos foram avaliados clinicamente, e coletadas amostras biológicas para análise comparativa dos resultados de baciloscopia de raspado intradérmico, detecção molecular do bacilo pela pesquisa da região RLEP por qPCR em lóbulos auriculares, titulação de anticorpos IgM Anti-PGL-I, e biópsia de pele em quem tinha lesão para exame histopatológico, detecção de RLEP, e sequenciamento do genoma completo do M. leprae. Foram clinicamente diagnosticados 351 casos, divididos nos grupos com manifestação clínica clássica e não clássica, e casos assintomáticos e 482 contatos saudáveis. A análise comparativa dos resultados demonstrou que a detecção molecular de RLEP em lóbulo auricular apresentou maior sensibilidade e especificidade e concordância com o diagnóstico clínico (72,5, 70,4 e Kappa= 0,42 respectivamente), seguida da detecção em biópsia de pele (sensibilidade= 65,8%), sorologia Anti PGl-I com 61,2% (52,2 de especificidade), baciloscopia (41,7%) e histopatologia (25,0%). Na associação do RLEP com a sorologia, houve o aumento da correlação com a clínica (Kappa= 0,55). Na avaliação do perfil de cepas circulantes, o perfil mais frequente foi o perfil 4N (52/66- 78,8%), seguido do subtipo 4P (4/66- 6,1%), 3I (9/66 -13,6%), e 1D (1/66- 1,5%). Na análise das regiões de droga-resistência, obtivemos 3/101 (3%) de mutação conferindo droga-resistência a dapsona, gene folP1. 1/40 (2,5%) conferindo resistência às quinolonas,em gyrB. A cepa resistente em gyrB, apresentava também mutação em folP1, e nos genes fadD9, ribD, pks4 e nth, considerada hipermutante. Nossos achados direcionam o exame de detecção molecular de RLEP por qPCR associado à sorologia Anti-PGL-I como boas ferramentas para diagnóstico laboratorial da hanseníase. As cepas do tipo 4, originárias da África, são o tipo mais frequentes na Amazônia e que algumas cepas circulantes apresentam drogaresistência às medicações do esquema de poliquimioterapia atual e às drogas alternativas.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 1548199 - ANDERSON MANOEL HERCULANO OLIVEIRA DA SILVA
Presidente - 1350218 - CLAUDIO GUEDES SALGADO
Externo à Instituição - JOHN STEWART SPENCER
Externo ao Programa - 2504686 - JOSAFA GONCALVES BARRETO