ANÁLISE DA DIVERSIFICAÇÃO CROMOSSÔMICA DE PEIXES DO GÊNERO Ancistrus (Siluriformes, Loricaridae) UTILIZANDO SEQUÊNCIAS REPETITIVAS DE DNA
DNA repetitivo, diversidade cariotípica, cromossomos sexuais, biodiversidade
Os peixes da família Loricariidae representam um importante componente da ictiofauna neotropical, e se destacam pela extensa diversidade citogenética. O gênero Ancistrus (Loricariidae, Hypostominae) abriga espécies que exibem grande diversidade cromossômica, incluindo ampla variação no número, morfologia e evolução de cromossomos sexuais. Regiões ricas em sequências repetitivas são relacionadas a formação de sítios cromossômicos instáveis, propensos a quebras na dupla fita de DNA, e rearranjos cromossômicos. Portanto, neste estudo pretende-se analisar a participação de sequências repetitivas em mecanismos de diversificação cariotípica em espécies de Ancistrus. As análises serão comparativas, realizadas a partir de técnicas de coloração convencional e bandeamentos cromossômicos; além de isolamento, clonagem, sequenciamento, caracterização molecular e mapeamento in situ de sequências repetitivas. Até o presente momento, foram analisados 25 exemplares pertencentes a duas espécies de Ancistrus (Ancistrus sp. 1 e Ancistrus sp. 2) coletados na bacia do rio Tocantins-Araguaia, Brasil. Ancistrus sp. 1 e Ancistrus sp. 2 apresentam cariótipos com 2n=38 (20m+14sm+4st, XX/XY) e 2n=34 (20m+14sm), respectivamente. O mapeamento do rDNA 18S ocorreu em um par de cromossomos em todas as amostras analisadas. Já o rDNA 5S ocorreu em múltiplos sítios em todas as amostras de Ancistrus sp. 2, enquanto em Ancistrus sp. 1 esta sequência ocorreu em sítios simples ou múltiplos em diferentes populações. O snDNA U1 ocorreu em apenas um par de cromossomos, enquanto o snDNA U2 apresentou maior diversidade, ocorrendo em apenas um par em Ancistrus sp. 2 e em dois pares em Ancistrus sp. 1. O mapeamento de sequências microssatélites evidenciou distintos padrões de organização genômica entre as espécies analisadas, indicando o envolvimento destas sequências na diferenciação de cromossomos sexuais (XX/XY), bem como em eventos de quebras e rearranjos, incluindo fissão/fusão cêntrica, nestas espécies. As sequências de snDNA U1 (150-pb), U2 (190-pb e 1112-pb) e U5 (114-pb) foram isoladas, clonadas, sequenciadas e tiveram as suas identidades confirmadas. Interessantemente, as sequências de snDNA U2 e U5 ocorreram associadas, separadas por espaços não transcritos, revelando uma condição sintênica para estes genes em Ancistrus. Em resumo, as espécies analisadas exibem diferentes constituições cariotípicas; além disso, nossos dados sugerem o envolvimento das sequências repetitivas analisadas na diversificação cromossômica destas espécies, incluindo a evolução independente de cromossomos sexuais e eventos de redução do 2n neste grupo de peixes