IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR, ASPECTOS FENOTÍPICOS E PERFIL DE SENSIBILIDADE DE ISOLADOS DE Trichosporon, Cutaneotrichosporon e Apiotrichum AOS ANTIFÚNGICOS COMERCIAIS E AO ÓLEO ESSENCIAL DE Syzygium aromaticum (CRAVO-DA-ÍNDIA) EXTRAÍDO POR FLUIDO SUPERCRÍTICO
Trichosporon; Biologia Molecular; Suscetibilidade Antifúngica; Extração por Flúido Supercrítico; Syzygium aromaticum.
Trichosporon passou por várias revisões e sua taxonomia foi modificada progressivamente. A identificação de espécies é difícil e necessita tanto de observações morfológicas quanto de identificação bioquímica, que às vezes são inconclusivos, por isso, é necessário buscar outras ferramentas, como a Biologia Molecular. Faltam testes padronizados para avaliar suscetibilidade antifúngica, porém geralmente os dados descritos corroboram entre si. Atualmente, o uso de plantas medicinais vem se tornando uma prática constante. Syzygium aromaticum, conhecido como cravo-da-índia, está sendo bastante estudado nos últimos anos e demonstrando atividades sobre bactérias e fungos. Através da Extração por Fluido Supercrítico (EFS), técnica “verde”, barata e que não produz resíduos tóxicos, podemos obter excelente óleo essencial (OE) do cravo-da-índia. Nosso objetivo foi identificar molecularmente, avaliar os aspectos fenotípicos e determinar a sensibilidade de isolados de Trichosporon, Cutaneotrichosporon e Apiotrichum aos antifúngicos comerciais e ao óleo essencial de Syzygium aromaticum (cravo-da-índia) extraído por Fluido Supercrítico. Neste trabalho, 26 isolados clínicos foram identificados como pertencentes aos gêneros Trichosporon, Cutaneotrichosporon e Apiotrichum através do sequenciamento da região Intergenic spacer 1 (IGS1). Observamos o desenvolvimento colonial ideal entre 35 e 40°C. A lipase foi a principal enzima extracelular produzida (100%) e caseinase não foi produzida (0%). Todos os isolados foram capazes de produzir biofilme, porém foram classificados como baixo. A suscetibilidade a antifúngicos foi determinada pelo método de microdiluição em caldo do CLSI para fluconazol (FLC), itraconazol (ITC) e anfotericina B (AMB). Elevada CIM para AMB, com todas as cepas resistentes e FLU foi à droga mais ativa entre os antifúngicos testados. Identificamos 15 componentes do OE, sendo o eugenol (60%) o principal composto. Este OE apresentou baixa porcentagem de hemólise, e o método de disco-difusão revelou elevado halo de inibição, variando de 21 a 37 mm, com CIM variando de 2 mg/mL a 174 mg/mL. A suscetibilidade dos biofilmes ao OE demonstrou CIM variando de 69,5 a 347,5 mg/mL. Além disso, o OE inibiu o desenvolvimento do biofilme ao ser utilizado no tratamento prévio da amostra. Este estudo permitiu observar a atividade antifúngica do OE de S. aromaticum contra espécies clinicamente relevantes, indicando o elevado potencial deste composto, como opção terapêutica no tratamento de infecções fungicas.